Kuman Corynebacterium diphtheriae bila dipulas dengan Gram adalah : Gram positif staf. Tetapi bila C. Diphtheriae diwarnai dengan pewarnaan yang spesifik yaitu NEISSER dan ALBERT memperlihatkan bentuk yang istimewa seperti ”halter” yang pada ujungnya kelihatan pentolan yang disebut ” granula”. Granula ini mula-mula dilihat oleh Babes Ernst dan dinamakan granula Babes Erns.
I. Cara Neisser.Pada pewarnaan ini diperlukan 3 macam larutan pulas yang masing-masing lazimnya disebut : Neisser A, Neisser B dan Neisser C. Ketiga larutan pulas ini disimpan dalam botol yang tersendiri.· Larutan Neisser A :Susunan : Methylen biru : 1 gram.Alkohol 70% : 20 ml.Asam acetat glaciale : 50 ml.Aquadest : 95 ml.· Larutan Neisser B :Susunan : Gentian violet : 1 gram.Alkohol absolut : 10 ml.Aquadest : 300 ml.Pemakaian : 2 bagian larutan Neisser A + 1 bagian larutan Neisser B. Campuran ini dibuat mendadak dan disebut juga Neisser I.· Larutan Neisser C (Neisser II).Susunan : Chrysoidin : 1 gramAlkohol panas : 300 ml.AtauBismark brown : 1 gram.Aquadest panas : 500 ml.Cara pewarnaan :1. Sediaan yang direkatkan digenangi dengan larutan Neisser I selama kira-kira 20 detik.2. Sediaan dicuci pada pancuran air kran pelan-pelan.3. Bubuhi larutan Neisser II selama 30 detik.4. Larutan pulas pada objek gelas dibuang saja tanpa dicuci dengan air, kemudian preparat dikeringkan dengan kertas saring.5. Periksa dengan mikroskop, hasil pewarnaan:Badan bakteri (seperti batang) : cokelat-muda.Granula pada kedua ujungnya : biru-hitam.
II. Cara Albert.Diperlukan 2 macam larutan pulas.· Larutan I.Susunan: Toluidin biru : 0,15 gram.Malachit hijau (Methyl hijau) : 0,20 gram.Asam asetat glacial : 1 ml.Alkohol 95% : 2 ml.Aquadest : 100 ml.Zat warna dilarutkan dulu dalam alkohol, kemudian tambah air dan akhirnya asam asetat glacial. Biarkan 24 jam, saring dan baru dapat dipakai.· Larutan II.Susunan: Jodium : 2 gram.Kalium Jodida : 3 gram.Aquadest : 300 ml.(Pada modifikasi Jensen, larutan II ini diganti dengan susunan larutan sbb : Jod 1 gram + KJ 2 gram dan aquadest 100 ml). Simpan dalam botol yang sawo matang.Cara pewarnaan :1. Buat sediaan dan sesudah direkatkan, bubuhi dengan larutan I, biarkan kira-kira 3-5 menit.2. Cuci dengan air kran, kemudian dibubuhi dengan larutan II, biarkan kira-kira 1 menit.3. Larutan pulas pada objek gelas dibuang, keringkan dengan kertas saring.4. Periksa dengan mikroskop dan hasil pewarnaan:Bakteri (seperti batang) : hijau.Granula atau kutubnya : hitam kebiru-biruan.
إرسال تعليق